blurred cannabis background
Cover skewed lines

Sprawozdanie dotyczące jakości

Analiza kannabinoidów

0,01 g (±.0001) kryształów zostało rozpuszczone w 1 ml metanolu (klasy HPLC). Roztwór był sonikowany przez 2 min i mieszany we wstrząsarce przez 10 sek. Próbki przed analizą HPLC były dalej rozcieńczane metanolem do ostatecznego stężenia 0,01 mg/ml.

Analiza chromatograficzna

Analizę zawartości kannabinoidów przeprowadzono przy użyciu modułu podziału Waters 2695 (Milford, MA, USA) wyposażonego w autowtryskiwacz, schładzalnik próbek, odgazowywacz próżniowy i ogrzewacz kolumnowy. Rozdział wszystkich kannabinoidów uzyskano przy użyciu kolumny RP YMC PRO C18 (150 x 4 mm I.D., S-3μm) połączonej z prekolumną C18 utrzymywaną w temperaturze 30°C przez piec kolumnowy CTO-20AC. Izokratyczna elucja w układzie acetonitryl:woda (0,1% FA) (4:1) została wykonana w 30 min. Prędkość przepływu utrzymana była na poziomie 0,8 ml/min. Kannabinoidy CBD i CBD-A monitorowane były przy długości fali odpowiednio 225 i 306 nm z użyciem detektora dwuwiązkowego Waters 2487 Dual Absorbance Detector (Milford, MA, USA). Iniekcja o objętości 20 μl została wstrzyknięta przy użyciu próbnika automatycznego w temperaturze 10°C. Ocena danych została przeprowadzona przy użyciu oprogramowania Empower 2. Kwantyfikacja CBD i CBD-A została wykonana metodą regresji liniowej krzywej kalibracyjnej poszczególnych standardów referencyjnych na wykresie zależności stężenia do powierzchni. Zakres kalibracji dla CBD i CBD-A był liniowy od 5 do 500 μg/ml. Próbki zawierające CBD lub CBD-A w stężeniu wyższym niż 40% były rozcieńczone 10-krotnie przed iniekcją. Czas retencji CBD-A wyniósł 7,1 min, a CBD – 8,1 min.

Analiza terpenów

10 mg homogenicznej próbki odważano i rozcieńczono 1 ml pentanu zawierającego 0,04% dekanu jako wzorca wewnętrznego. Probówkę z próbką umieszczano w ultradźwiękowej łaźni na 5 minut i wymieszano. 200 µl przygotowanego roztworu rozcieńczono 800 µL czystego pentanu, wymieszano i poddano analizie GC-FID.Do analizy terpenoidów użyto chromatografu gazowego Agilent HP 6890 wyposażonego w detektor FID. Rozdział uzyskano przy użyciu kolumny kapilarnej Rtx-5 w/Integra-Guard (30 m długości, 0,25 mm I.D. i 0,25 µm df). Nastrzyki wykonano w trybie split wykorzystując liner typu split/splitless z wełną szklaną. Program rozpoczął się w temperaturze 50°C zwiększonej do 280°C (narost 15°C/min) i utrzymywanej przez 15 min, dając całkowity czas równy 31 min. 2 µL każdej próbki zostało nastrzyknięte helem jako gazem nośnym (w trybie stałego przepływu 1 ml/min) z podziałem strumienia 1:10. Zastosowano temperatury: 280°C dla dozownika, 260°C dla linii transferowej. Ocena danych została przeprowadzona przy użyciu oprogramowania Chemstation v.D.02.00.275 (Agilent Technologies).Lista analizowanych terpenów:
  • RT substancji
  • Dekan (IS) 5,165
  • α-Pinen 4,635
  • Mircen 5,095
  • Limonen 5,538
  • Linalol 6,176
  • E-Kariofilen 9,328
  1. Stężenie dekanu w pentanie 0,04% = 1 ml pentanu zawiera 0,292 mg dekanu
  2. 0,01 g próbki rozpuszczone w 1000 µL pentanu zawierającego 0,04 % dekanu
  3. Ekstrakt o stężeniu 10 mg/ml rozpuszczony 5 razy. Ostateczne stężenie ekstraktu w roztworze 2,5 mg/ml (0,0025 g/ml)
  4. Ostateczne stężenie dekanu w roztworze 0,073 mg/ml
  5. 0,073 mg dekanu / 0,0025 g ekstraktu = ekstrakt 29,2 mg/g
  6. Obliczenia
Powierzchnia piku dekanu – ekstrakt 29,2 mg/g Powierzchnia piku analizowanego związku – ekstrakt x mg/g x = 29,2 × Powierzchnia piku analizowanego związku / Powierzchnia piku dekanu = ilość ekstraktu mg/g analizowanego związku