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Analisi dei cannabinoidi

00,01 g (± 0,0000) di cristalli sono stati sciolti in 1 mi di metanolo (grado HPLC). La soluzione è stata sottoposta a ultrasuoni per 2 min e al vortex per 10 secondi. I campioni prima dell'analisi HPLC sono stati ulteriormente diluiti con metanolo alla concentrazione finale di 0,01 mg / ml.

Analisi cromatografica

L'analisi del contenuto di cannabinoidi è stata eseguita utilizzando il modulo di separazione Waters 2695 (Milford, MA, USA) dotato di autoiniettore, refrigeratore di campioni, degasatore sottovuoto e unità di riscaldamento a colonna. La separazione di tutti i cannabinoidi è stata eseguita sulla colonna RP YMC PRO C18 (150 x 4 mm I.D., S-3μm) accoppiata con precolonna C18 mantenuta a 30 °C da un forno a colonna CTO-20AC. L'eluizione isocratica consisteva in acetonitrile: l'acqua (FA 0,1%) (4: 1) è stata fatta in 30 minuti. La portata è stata mantenuta a 0,8 ml/ in. I cannabinoidi CBD e CBD-A sono stati monitorati rispettivamente a 225 e 306 nm di lunghezza d'onda utilizzando il rivelatore a doppia assorbenza Waters 2487 (Milford, MA, USA). Il volume di iniezione di 20 μl è stato iniettato usando un campionatore automatico a 10 °C. La valutazione dei dati è stata eseguita utilizzando il software Empower 2.

La quantificazione di CBD e CBD-A è stata ottenuta dall'equazione di regressione lineare della curva di calibrazione degli standard di riferimento individuali tracciando la concentrazione rispetto al rapporto di area. L'intervallo di calibrazione per CBD e CBD-A è lineare da 5 a 500 μg / ml. I campioni contenenti concentrazione di CBD o CBD-A superiore al 40% sono stati indeboliti diluendoli 10 volte prima dell'iniezione. Il tempo di ritenzione del CBD-A è a 7,1 minuti e del CBD a 8,1 minuti.

Analisi dei terpeni

10 mg di campione omogeneo sono stati ridimensionati e diluiti con 1 ml di pentano contenente lo 0,04% di decano come standard interno. La provetta contenente la soluzione campione è stata posta in bagno a ultrasuoni per 5 minuti e quindi miscelata. 200 μl di soluzione preparata sono stati diluiti con 800 μL di pentano puro miscelato e analizzati singolarmente mediante GC-FID.

Per l'analisi dei terpenoidi è stato utilizzato un gascromatografo Agilent HP 6890 dotato di FID. La separazione è stata eseguita su una colonna capillare Rtx-5 con Integra-Guard (30 m di lunghezza, 0,25 mm di diametro e 0,25 μm di df). Le iniezioni sono state eseguite in modalità split utilizzando una fodera split/splitless per uso generico con lana di vetro. Il programma è iniziato a 50 °C, aumentato a 280 °C (a 15 °C / min) e tenuto per 15 minuti per un totale di 31 minuti. 2 μL di ciascun campione sono stati iniettati con elio come gas di trasporto (modalità flusso costante, 1 ml/min) utilizzando un rapporto di divisione 1:10. Le temperature sono state applicate a 280 °C per l'iniettore, 260 °C per la linea di trasferimento. I dati sono stati analizzati utilizzando Chemstation v.D.02.00.275 (Agilent Technologies).

Elenco dei terpeni bersaglio:

  • Composto RT
  • Decano (IS) 5.165
  • α-pinene 4,635
  • Mircene 5,095
  • Limonene 5,538
  • Linalolo 6.176
  • E-Caryophyllene 9,328
  1. La concentrazione di decano in pentano 0,04% = 1 ml di pentano contiene 0,292 mg di decano.
  2. 0,01 g di campione sciolto con 1000 μL di pentano contenente 0,04% di decano.
  3. Estratto con concentrazione di 10 mg / ml sciolto 5 volte. Concentrazione finale dell'estratto in soluzione 2,5 mg / ml (0,0025 g / ml).
  4. Concentrazione finale di decano in soluzione 0,073 mg / ml.
  5. 0,073 mg di decano / 0,0025 g di estratto = 29,2 mg / g di estratto
  6. Calcoli

Area di picco del decano - 29,2 mg / g di estratto
Area di picco del composto bersaglio - x mg/g di estratto

x = 29.2 × Area di picco del composto bersaglio / area di picco del decano = quantità del composto obiettivo mg / g estratto.

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